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腎上腺素(EPI)elisa試劑盒
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品牌:原鑫生物
貨號(hào):YX-131271
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腎上腺素(EPI)elisa試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法。用EPI抗原包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的EPI與包被的EPI競(jìng)爭(zhēng)生物素標(biāo)記的抗EPI單抗上的結(jié)合位點(diǎn),游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素,生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測(cè)OD值,EPI濃度與OD450值之間呈反比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中EPI的濃度。


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方法: 在一項(xiàng)隨機(jī)、交叉、雙盲研究設(shè)計(jì)中,13 名健康、訓(xùn)練有素的休閑男性運(yùn)動(dòng)員在兩個(gè)不同的場(chǎng)合進(jìn)行了跑步機(jī)運(yùn)動(dòng)測(cè)試(60 分鐘,70% VO 2max) 攝入 6 mg/kg 體重的咖啡因或安慰劑后。在運(yùn)動(dòng)前、運(yùn)動(dòng)結(jié)束后立即和運(yùn)動(dòng)結(jié)束后 2 小時(shí)采集血樣。測(cè)定了 IL-10、IL-6、IL-1β、IL-1ra、IL-4、IL-8、IL-12 和 IFN-γ、腎上腺素、皮質(zhì)醇和環(huán)磷酸腺苷 (cAMP) 的血漿濃度。還測(cè)定了全血培養(yǎng)物響應(yīng)內(nèi)毒素 (LPS) 產(chǎn)生細(xì)胞因子的能力。使用時(shí)間(運(yùn)動(dòng)前、運(yùn)動(dòng)后、恢復(fù))x 條件(咖啡因、安慰劑)在受試者之間進(jìn)行方差分析并重復(fù)測(cè)量來分析血液變量的變化。


結(jié)果: 咖啡因補(bǔ)充誘導(dǎo)更高腎上腺素水平在補(bǔ)充參與者運(yùn)動(dòng)后(257.3±53.2對(duì)134.0±25.7 PG·毫升- 1,p值= 0.03)和更高的皮質(zhì)醇水平恢復(fù)(46.4±8.5對(duì)32.3±5.6微克后· mL - 1,p = 0.007),但不影響血漿 cAMP 水平(p = 0.327)。運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)導(dǎo)致 IL-10、IL-6、IL-1ra、IL-4、IL-8、IL-12 和 IFN-γ 血漿水平顯著升高,恢復(fù)后 IL-6 和 IL-10 水平保持高水平. 補(bǔ)充咖啡因僅影響 IL-6(3.04 ± 0.40 對(duì) 3.89 ± 0.62 pg·mL - 1,p = 0.003)和 IL-10(2.42 ± 0.54 對(duì) 3.47 ± 0.72 pg·mL - 1, p = 0.01) 水平,在補(bǔ)充條件下運(yùn)動(dòng)后濃度更高。沒有觀察到咖啡因?qū)w外刺激的細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響。


結(jié)論: 本研究的結(jié)果表明,補(bǔ)充咖啡因可顯著提高兩種基本細(xì)胞因子(如 IL-6 和 IL-10)對(duì)運(yùn)動(dòng)的反應(yīng)。然而,咖啡因不影響其他細(xì)胞因子的血漿水平和體外刺激的細(xì)胞因子產(chǎn)生的變化。


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